Coxiella burnetii associated with BVDV (Bovine Viral Diarrhea Virus), BoHV (Bovine Herpesvirus), Leptospira spp, Neospora caninum, Toxoplasma gondii and Trypanosoma vivax in reproductive disorders in cattle / Coxiella burnetii associada ao BVDV (Vírus da Diarreia Viral Bovina), BoHV (Vírus do Herpes Bovino), Leptospira spp, Neospora caninum, Toxoplasma gondii e Trypanosoma vivax em distúrbios reprodutivos em bovinos

Abstract This is a cross-sectional study to assess the presence of antibodies in ruminants against selected pathogens associated with reproductive disorders in cattle in four Brazilian states, including the zoonotic agent Coxiella burnetii. The used tests were Virus Neutralization Assay for IBR and BVD, Microscopic Agglutination Test for Leptospira spp., Indirect Fluorescent Antibody Test (IFAT) for C. burnetii and Toxoplasma gondii, and Enzyme-Linked Immunosorbent Assay for Neospora caninum and Trypanosoma vivax. Seropositivity for C. burnetii was 13.7% with titers from 128 to 131,072; 57.8% for BoHV-1, with titers between 2 and 1,024; 47.1% for BVDV-1a, with titers from 10 to 5,120; 89.2% for N. caninum; 50% for T. vivax; and 52.0% for Leptospira spp., with titers between 100 to 800 (the following serovars were found: Tarassovi, Grippotyphosa, Canicola, Copenhageni, Wolffi, Hardjo, Pomona and Icterohaemorrhagiae); 19.6% for T. gondii with titer of 40. This is the first study that has identified C. burnetii in cattle associated with BoHV and BVDV, N. caninum, Leptospira spp., T. gondii and T. vivax. Thus, future studies should be conducted to investigate how widespread this pathogen is in Brazilian cattle herds.

Resumo Este é um estudo transversal para avaliar a presença de anticorpos em ruminantes contra patógenos selecionados e associados a distúrbios reprodutivos em bovinos de quatro estados brasileiros, incluindo o agente zoonótico Coxiella burnetii. Os testes utilizados foram Teste de Vírus-Neutralização para BoHV e BVDV, teste de Aglutinação Microscópica para Leptospira spp., Reação de Imunofluorescência Indireta for C. burnetii e Toxoplasma gondii, e Ensaio de Imunoabsorção Enzimática para Neospora caninum e Trypanosoma vivax. A soropositividade para C. burnetii foi de 13,7% com títulos de 128 a 131.072; 57,8% para BoHV-1, com títulos entre 2 a 1.024; 47,1% para BVDV-1a, com títulos de 10 a 5.120; 89,2% para N. caninum; 50% para T. vivax; e 52,0% para Leptospira spp., com títulos entre 100 a 800 (sorovares encontrados: Tarassovi, Grippotyphosa, Canicola, Copenhageni, Wolffi, Hardjo, Pomona e Icterohaemorrhagiae) 19,6% para T. gondii com título de 40. Este é o primeiro estudo que evidencia a participação de C. burnetii em bovinos associada ao Vírus da Rinotraqueíte bovina infecciosa e da diarreia viral bovina, N. caninum, Leptospira spp., T. gondii e T. vivax em bovinos. Desta forma, futuros estudos devem ser conduzidos a fim de investigar o quão disseminado se encontra este patógeno em rebanhos bovinos brasileiros.

A cross-sectional study to estimate the frequency of anti-bovine viral diarrhea virus-1 antibodies in domestic pigs of Mossoró region in the state of Rio Grande do Norte, Brazil / Estudo transversal para estimar a frequência de anticorpos anti-vírus da diarreia viral bovina-1 em suínos domésticos da região de Mossoró, no estado do Rio Grande do Norte, Brasil

ABSTRACT: This study investigated the occurrence of antibodies for BVDV-1 in swine herds located in the region of Mossoró city of the state of Rio Grande do Norte, Brazil. A sample size of 412 animals was estimated assuming unknown prevalence (set at 50%). Virus neutralization assay was used to the detect the presence of antibodies for BVDV-1 and the results found were analysed using multivariable logistic regression model. The obtained prevalence was 4% at animal level and 45% at the animal and herd level. The titers were highly variable between animals and within farms. The multivariable logistic regression analysis showed an association between being housed outside and exposure to BVDV-1 (OR=0.24, 95% CI:0.06, 0.96, P=0.04). Highly correlated data and low prevalence of antibodies at the animal level resulted in insufficient power to detect significant differences with other selected risk factors. In conclusion, the prevalence is within the range reported for other countries.

RESUMO: Este estudo investigou a ocorrência de anticorpos contra o BVDV-1 em rebanhos suínos localizados na região da cidade de Mossoró do Estado do Rio Grande do Norte, Brasil. Um tamanho de amostra de 412 animais foi estimado assumindo uma prevalência desconhecida (fixada em 50%). O teste de virusneutralização foi utilizado para detectar a presença de anticorpos ao BVDV-1 e os resultados obtidos foram analisados usando o modelo de regressão logística multivariada. A prevalência obtida foi de 4% em nível animal e de 45% dos rebanhos. Os títulos foram muito variáveis entre os animais e dentro de fazendas. A análise de regressão logística multivariada apontou associação entre animais criados soltos e a exposição ao BVDV-1 (OR=0,24; 95% IC: 0,06; 0,96; P=0.04). A alta correlação entre os dados junto com a baixa prevalência de anticorpos a nível animal pode ter sido insuficiente para que as diferenças reais fossem detectadas. Em conclusão, a prevalência está dentro do intervalo referido em outros países.

Molecular characterization of group A bovine rotavirus in southeastern and central-western Brazil, 2009-2010 / Caracterização molecular de rotavírus bovino do grupo A nas regiões Sudeste e Centro-Oeste do Brasil

Rotavirus is an important cause of neonatal diarrhea in humans and several animal species, including calves. A study was conducted to examine 792 fecal samples collected from calves among 65 dairy and beef herds distributed in two of Brazil's major livestock producing regions, aiming to detect the occurrence of rotavirus and perform a molecular characterization of the rotavirus according to G and P genotypes in these regions. A total of 40 (5.05%) samples tested positive for rotavirus by the polyacrylamide gel electrophoresis (PAGE) technique. The molecular characterization was performed by multiplex semi-nested RT-PCR reactions, which indicated that the associations of genotypes circulating in herds in Brazil's southeastern region were G6P[11], G10P[11], G[-]P[5] + [11], G[-]P[6] in the state of São Paulo and G6P[11], G8P[5], G11P[11], G10P[11] in the state of Minas Gerais. In the central-western region, the genotypes G6P[5] + [11], G6P[5], G8P[-], G6P[11], G [-] P[1], G[-] P[11], and G[-] P[5] were detected in the state of Goiás, while the genotypes G6P[5], G8[P11], G6[P11], G8[P1], G8[P5], G6[P1] were circulating in herds in the state of Mato Grosso do Sul. The genotypic diversity of bovine rotavirus found in each region under study underlines the importance of characterizing the circulating samples in order to devise the most effective prophylactic measures.

Rotavírus é uma importante causa de diarreia neonatal em humanos e várias espécies animais, incluindo bezerros. Foi realizado um estudo a partir de 792 amostras fecais colhidas de bezerros, provenientes de 65 rebanhos de leite e corte distribuídos em duas das maiores regiões produtoras no Brasil, com o objetivo de se detectar a ocorrência de rotavírus e realizar a sua caracterização molecular quanto aos genotipos G e P nestas regiões. Um total de 40 (5,05%) de amostras testadas foram positivas para rotavírus pela técnica de eletroforese em gel de poliacrilamida (PAGE). A caracterização molecular foi realizada através de reações do tipo Multiplex semi-nested RT-PCR demonstrando que as associações de genotipos circulantes em rebanhos da região Sudeste foram G6P[11], G10[P11], G[-]P[5]+[11], G[-]P[6] no Estado de São Paulo e G6P[11], G8P[5], G11P[11], G10P[11] no Estado de Minas Gerais. Na região Centro-Oeste, foram detectados no Estado de Goiás os genotipos G6P[5]+[11], G6P[5], G8P[-], G6P[11], G[-]P[1], G[-]P[11], G[-]P[5] enquanto os genotipos G6P[5], G8[P11], G6[P11], G8[P1], G8[P5], G6[P1] eram circulantes em rebanhos do Estado do Mato Grosso do Sul. A diversidade genotípica de rotavírus bovino encontrada em cada região estudada justifica a importância da caracterização das amostras circulantes para medidas profiláticas mais efetivas.

Comparação dos testes de virusneutralização contra os genótipos 1 e 2 do vírus da diarreia viral bovina (BVDV-1 e BVDV-2) em bovinos de rebanhos naturalmente infectados / Comparison of virusneutralization tests against genotypes 1 and 2 of the bovine viral diarrhoea virus (BVDV-1 and BVDV-2) in cattle of naturally infected herds

Os resultados dos testes de virusneutralização (VN) contra os genótipos do vírus da diarreia viral bovina (BVDV-1 e BVDV-2), bem como os respectivos títulos de anticorpos, foram comparados em 1.925 amostras de soro sanguíneo obtidas de rebanhos bovinos naturalmente infectados e não vacinados contra o BVDV, provenientes dos Estados de São Paulo e Minas Gerais. A proporção de amostras reagentes entre os genótipos foi analisada pelo Teste de McNemar, e os títulos de anticorpos das amostras reagentes ao BVDV-1 e ao BVDV-2 foram comparados pelo Teste de Wilcoxon. Não foi verificada discordância na proporção de bovinos reagentes ao BVDV-1 e ao BVDV-2 (P>0,05). No entanto, houve discordância entre os títulos de anticorpos detectados nos testes de VN contra os genótipos 1 e 2 do BVDV (P<0,0001). Embora a proporção de animais reagentes contra ambos os genótipos do BVDV tenha sido semelhante, resultados falso-negativos seriam obtidos se 67 amostras (3,5 por cento) tivessem sido submetidas apenas ao teste de VN, para o BVDV-1, e em 51 amostras (2,65 por cento), apenas para o BVDV-2. Alguns rebanhos apresentaram títulos de anticorpos superiores para o BVDV-1, enquanto outros para BVDV-2, demonstrando assim a ocorrência da infecção pelos diferentes genótipos do vírus entre os rebanhos analisados. Portanto, tais resultados demonstraram a necessidade da inclusão de ambos os genótipos do BVDV nos testes de VN.

The virusneutralization test (VN) results against bovine viral diarrhoea virus genotypes (BVDV-1 and BVDV-2), and the respective titers of antibodies, were compared in 1,925 serum samples collected from unvaccinated and naturally infected cattle herds, located in the states of São Paulo and Minas Gerais, Brazil. The proportion of reagent samples among the genotypes was evaluated by McNemar test and the antibody titers against BVDV-1 and BVDV-2 were compared by Wilcoxon test. There were no disagreement in the proportion of BVDV-1 and BVDV-2 reagent samples (P>0.05). However, there was a disagreement among titers of antibodies detected in the VN tests against BVDV genotypes (P<0.0001). Although the proportion of reagent animals to BVDV genotypes was similar, false negative results would be obtained if 67 samples (3.5 percent) had been submitted only to VN test against BVDV-1, and 51 samples (2.65 percent) only against BVDV-2. Some herds had higher titers of antibodies for BVDV-1, while others for BVDV-2, thus demonstrating the occurrence of infection by different virus genotypes among the analyzed herds. Therefore, these results demonstrated the need for inclusion of both BVDV genotypes in VN tests.

Implicações técnicas da vacinação na resposta imune contra o vírus da febre aftosa / Techinical implications of the vaccination in the immune response against the foot-and-mouth disease virus

Na bovinocultura brasileira, a vacinação contra o vírus da Febre Aftosa (FA) é fundamental para a fase inicial de erradicação da enfermidade. Mesmo a qualidade da vacina tendo controle rígido feito pelos órgãos oficiais, restam variáveis técnicas ainda não monitoradas como manipulação, transporte e conservação pelo consumidor, dose, local e forma de aplicação que interferem na resposta imune, preocupações essas, que direcionam o presente estudo. Assim, pela pesquisa de anticorpos neutralizantes do vírus da FA em placas de microtitulação com cultivo de células BHK-21, foram determinados os títulos, calculados em logaritmo decimal (SN), em soros sanguíneos de bovinos vacinados conforme o protocolo apresentado. No primeiro grupo com 25 animais, a média de SN foi igual a 2,37 e 2,19, respectivamente, 30 e 180 dias após a vacinação, cuja vacina foi manejada por especialista com todos os cuidados técnicos recomendados. Outro grupo com 140 bovinos, distribuídos em 5 fazendas distintas, apresentou média de SN igual a 1,66 e 1,5l depois de 30 e 180 dias após a vacinação, cuja vacina foi manejada sem acompanhamento técnico e por indivíduos não especializados. Finalmente um terceiro grupo com 10 animais, que ficaram sem vacinação, apresentou média de SN igual a 0,82 e 0,81, também 30 e 180 dias após a aplicação do placebo. Assim, só os cuidados com a qualidade da vacina são insuficientes para proporcionar títulos satisfatórios que determinam proteção dos rebanhos contra o vírus da FA, uma vez que a literatura pertinente considera rebanhos com 1,52 de média do SN como tendo 50% dos animais protegidos, e com 1,70 como tendo mais de 70% de proteção, no período de até 7 meses.

Anticorpos contra o vírus rábico em seres humanos com atividades no Hospital Veterinário da Universidade Federal de Mato Grosso. Cuiabá, MT, Brasil / Antibodies to the rabies virus in humans working in a veterinary Hospital environment at the Universidade Federal de Mato Grosso. Cuiabá, MT, Brazil

Uma caracterizaçäo do perfil sorológico de 102 indivíduos com constantes atividades no Hospital Veterinário da Universidade Federal de Mato Grosso foi realizada por meio de fichas epidemiológicas e provas sorológicas para titulaçäo de anticorpos contra o vírus da raiva, no período de novembro de 1999 a novembro de 2000. Dessas pessoas, 27 tinham sido vacinadas em esquema de pré-exposiçäo e 75 näo tinham recebido nenhum esquema de vacinaçäo anti-rábica. Os resultados deste estudo puderam classificar os indivíduos em diferentes grupos (G1, G2, G3 e G4). As 19 (18,6 por cento) pessoas do grupo G1, previamente vacinadas contra raiva, apresentaram titulaçäo abaixo de 0,5 UI/mL; no grupo G2, as 8 (7,8 por cento) pessoas, também previamente vacinadas, apresentaram títulos superiores a 0,5UI/mL; no grupo G3, as 67 (65,6 por cento) pessoas, näo vacinadas contra o vírus rábico, apresentaram titulaçäo abaixo de 0,5UI/mL; e finalmente no grupo G4, as 8 (7,8 por cento) pessoas, que nunca receberam esquema vacinal, apresentaram títulos acima de 0,5UI/mL. Os resultados obtidos demonstraram que existe necessidade de avaliaçäo epidemiológica e acompanhamento sorológico. de pessoas submetidas a vacinaçäo anti-rábica pré-exposiçäo em hospitais veterinários

Detecção de anticorpos contra o vírus da diarréia viral bovina no soro sangüíneo, no leite individual e no leite de conjunto em tanque de expansão de rebanhos não vacinados / Detection of antibodies to the bovine viral diarrhoea virus in serum, in individual milk and in bulk tank milk from unvaccinated herds

Pela pesquisa de anticorpos contra o vírus da diarréia viral bovina (BVD), utilizando o teste de ELISA indireto, foi estudada a correlação existente entre a proporção de vacas lactantes e a presença de anticorpos no leite de conjunto do tanque de expansão. Para isso foram analisadas amostras de soro sangüíneo e de leite individual de 376 vacas lactantes não vacinadas, provenientes de 10 propriedades localizadas nas regiões Sul do Estado de Minas Gerais e Nordeste do Estado de São Paulo, assim como uma amostra do leite do tanque de expansão de cada rebanho. Em todas as propriedades foram encontradas vacas reagentes no soro sangüíneo, cuja freqüência variou de 12,28 a 100,00 por cento. Já a análise do leite individual não revelou animais reagentes em duas propriedades, e nas demais a freqüência variou de 5,26 a 70,83 por cento. Foram detectados anticorpos no leite do tanque de expansão das propriedades cuja proporção de soros sangüíneos reagentes foi igual a ou maior que 82,86 por cento, e cuja proporção de leites individuais reagentes foi igual a ou maior que 32,14 por cento.

Monitoraçäo de anticorpos neutralizantes para o vírus da rinotraqueíte infecciosa bovina em bezerros / Monitoring of neutralizing antibodies against infectious bovine rhinotracheitis virus in calves

O presente estudo foi realizado em uma fazenda do município de Viradouro, localizada no Nordeste do Estado de Säo Paulo. Teve como objetivo monitorar ao longo de 8 meses os títulos de anticorpos neutralizantes para o BHV-1, em bezerros nascidos de vacas que estavam ou näo infectadas naturalmente por este vírus e que foram vacinadas e revacinadas contra a Rinotraqueíte Infecciosa Bovina (IBR) antes do parto. Foram analisados, através do teste de soroneutralizaçäo, os soros sangüíneos de 34 bezerros, divididos em quatro grupos. Os resultados obtidos demonstraram que nos grupos de bezerros nascidos de vacas reagentes e näo vacinadas os anticorpos de origem colostral persistiram, em média, até os 3 meses de idade. De modo geral, bezerros nascidos de vacas vacinadas, independentemente de estarem infectadas ou näo, apresentaram médias de títulos de anticorpos maiores que as médias demonstradas por bezerros provenientes de vacas näo vacinadas. No entanto, devido à elevada prevalência do BHV-1 (86,8 por cento) no local de estudo, mesmo esses títulos de anticorpos näo impediram a infecçäo desses animais. A alta prevalência do BHV-1 resultou na detecçäo de anticorpos de origem materna em bezerros nascidos de vacas que, inicialmente, näo foram reagentes ao teste de soroneutralizaçäo, provavelmente como resultado da soroconversäo das respectivas mäes no intervalo transcorrido entre a triagem e o momento do parto. A alta prevalência observada também ocasionou a infecçäo dos bezerros, filhos de vacas näo vacinadas, após o declínio dos anticorpos de origem colostral

Aplicaçäo de uma técnica de ELISA ("Enzyme-linked immunosorbent assay") no diagnóstico direto do vírus da febre aftosa / Use of a technic ELISA-Enzyme-linked immunosorbent assay in the direct diagnosis of fost-and-mouth disease virus

O método do "Sandwich indireto" do ELISA ("Enzyme-Linked Immunosorbent Assay"), foi nesse trabalho empregado com vantagens para detecçäo e tipificaçäo direta dos sorotipos O1, A24, AVenceslau e C3 do vírus da febre aftosa presentes em suspensöes antigênicas brutas provenientes de cultura celular, do epitélio de coxim plantar de cobaias, de carcaça de camundongos e de epitélio lingual bovino, infectados com essas estirpes virais. Os títulos obtidos no ELISA foram sempre superiores aos da reaçäo de fixaçäo de complemento, apresentando uma sensibilidade 3,8 a 80 vezes maior do que esta última reaçäo. Quanto à especificidade do ensaio imunoenzimático foi observado o desenvolvimento de reaçöes heterotípicas cruzadas principalmente da estirpe O1 com o anti-soro anti-C3, da estirpe A24 com o anti-O1, e anti-C3, da estirpe AVenceslau com anti-O1 e da estirpe C3 com o anti-O1, o que näo ocorreu na reaçäo de fixaçäo de complemento. No entanto, isto näo impediu que as 4 estirpes virais estudadas (O1, A24, AVenceslau e C3) fossem classificadas pelo ELISA em seus respectivos sorotipos